PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>97.0%(GC)　芽孢桿菌屬　25g

絲抑蛋白(Maspin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>97.0%(GC)　剛毛絲毛伏革菌　5g

幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　吉氏根瘤菌　1g

Zeste同源物增強子2(EZH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　微球菌屬　5g

微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　小托柄鵝膏菌　25g

肝配蛋白A4(EFNA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　阿魏側耳　1g

EB病毒誘導蛋白3(EBI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　大腸桿菌　1g

前蛋白關聯(lián)子宮內(nèi)膜蛋白(PAEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　巴斯德酵母　25g

淋巴細胞抗原75(LY75)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　彎曲高溫單孢菌　5g

CD276分子(CD276)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　2.0 M 溶液　桑莖點霉　100ml

信號素3E(SEMA3E)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　南方異擔子菌　1g

小白蛋白(PVALB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　煙曲霉　25g

衰老關鍵蛋白4(FBLN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　灰平鏈霉菌　5g

Sideroflexin 1蛋白(SFXN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　枯斑擬盤多毛孢　100g

SRC/FGR/YES相關FYN癌基因(FYN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　食氮嗜異生質(zhì)菌　25g

染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　漢遜德巴利酵母　5g

氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%(HPLC)　阪崎腸桿菌　1mg

氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%(GC)　麥根腐平臍蠕孢　1g
青霉通用探針法熒光PCR檢測試劑盒9號染色體開放閱讀框115抗體CCP peptide (cyclic citrullinad peptide,CCP)  瓜氨酸環(huán)肽300 ul

CTDSPL蛋白抗體CCP peptide (cyclic citrullinad peptide,CCP)  瓜氨酸環(huán)肽100 ul

CTDSPL2蛋白抗體GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide  胰高血糖素樣肽-1（多肽）500 ul

酰膽酯酶相關蛋白抗體ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov  腎上腺髓質(zhì)素蛋白(N端20肽)100 ul

卷曲螺旋結構域蛋白83抗體GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS100 ul

二氫嘧啶酶相關蛋白5抗體PACAP(1-38 Peptide)  腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38（全蛋白）300 ul

酸化二氫嘧啶酶樣2抗體MBP(Myelin Basic Proin, MBP)peptide  髓鞘性蛋白(多肽抗原)100 ul

腦衰蛋白反應調(diào)節(jié)蛋白4抗體Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽300 ul

卷曲螺旋結構域蛋白87抗體NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經(jīng)肽 Y（1-36多肽）100 ul