產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:貓免疫缺陷病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 英文名稱:Feline Immunodeficiency Virus(FIV)RTPCR 編號(hào):HE30986-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 一縮二/雙丙甘醇/二/二聚/二羥基代二丙醚/-(1,2)-醚/縮二/二(2-羥丙基)醚/丙醇醚/氧化二丙醇/雙/二羥式代二丙醚雙(2-羥丙基)醚/1,1'-氧二-2-丙醇/β, β-二羥二正丙醚/DPG 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;10g 十二醇/正十二醇/月桂醇/正十二烷醇/1-十二烷醇/椰油醇/十二碳醇/C12醇/1-十二醇/Dodecanol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;50g 1,6-己二醇/1,6-二羥基己烷/六亞甲基二醇/六亞甲基甘醇/1,6-乙烯乙二醇/六次甲基甘醇/1,6-Hexanediol 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS 包裝;1g 1,2,6-己三醇/1,2,6-三羥基乙烷/1,2,6-Hexanetriol 質(zhì)量規(guī)格:BS 包裝;5g 正己醇/1-己醇/正六醇/戊基甲醇/1-羥基己烷/己醇/1-Hexanol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 聚2000/聚醚2000/聚2000/PPG 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 包裝;1g 1,2-/1,2-二羥基丙烷/甲基乙二醇//α-/乙二醇/1,2-二羥基丙醇/1,2-Propanediol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 三乙二醇/二縮三乙二醇/乙二醇二(β-羥乙基醚)/二乙二醇/三甘醇/三乙二醇醚/TEG 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g /1,5-/膠醛/Glutaraldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 多聚甲醛/聚合甲醛/仲甲醛/固體甲醛/聚甲醛/聚氧化甲烯/聚蟻醛/Paraformaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25mg 合氯醛/合三氯乙醛/2,2,2-三氯-1,1-乙二醇/三氯乙二醇/化氯醛/含氯醛/TCA 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;250mg 肉桂醛/桂皮醛/苯/亞芐基乙醛/反式肉桂醛/3-苯基/桂醛/β-苯/Cinnamaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;10mg 4-(二甲氨基)/對(duì)二甲氨基/4-二甲氨基/對(duì)二甲替氨基/N,N-二甲基-4-氨基/對(duì)二基/對(duì)二甲基氨基苯醛/4-N,N-二甲氨基/對(duì)(N,N-二甲基)/4-Dimethylaminobenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g /安息香醛/人造苦杏仁油/苦杏仁油/苯醛/苯亞甲基醛/芐醛/Benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 2-氯/鄰氯/OCBA 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR 包裝;1g 檸檬醛/香葉醛/3,7-二甲基-2,6-辛二烯醛/牛兒醛/橙花醛/牻牛兒醛/2,6-二甲基-2,6-辛二烯醛/3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醛/Citral 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 2,4-二氯/2,4-DCAD 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 包裝;5g 貓免疫缺陷病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Actinoplanes│digitatis 中文名稱:指狀游動(dòng)放線菌種屬:Actinoplanes│digitatis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:95% Acremonium│sp. 中文名稱:枝頂孢霉屬菌種種屬:Acremonium│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗真菌,抗細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0138生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié);-80℃冰箱凍結(jié) 純度:98% Eupenicillium│sp. 中文名稱:正青霉屬種屬:Eupenicillium│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:活性物質(zhì),組織蛋白酶B抑制活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0018生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié) 純度:98% Actinomadura│ochracea 中文名稱:赭石馬杜拉放線菌種屬:Actinomadura│ochracea提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0039生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% Streptomyces│plicatus 中文名稱:褶皺鏈霉菌種屬:Streptomyces│plicatus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生放線菌素D培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% Streptomyces│aculeolatus 中文名稱:針孢鏈霉菌種屬:Streptomyces│aculeolatus分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌11培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0011生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:99% Gliomastix│sp. 中文名稱:粘鞭菌屬菌種屬:Gliomastix│sp.分離基物:枯枝枯葉提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:代謝產(chǎn)物調(diào)控研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:99% Streptomyces│azureus 中文名稱:遠(yuǎn)青鏈霉菌種屬:Streptomyces│azureus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Thiostrepton硫鏈絲菌肽耐受菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |