Anti-ARF6抗體 基因擴(kuò)增儀抗體修復(fù)方式:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫;
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
酶標(biāo)抗體效價(jià)測定程序:各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價(jià)測定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價(jià)測定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C過;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 測定OD值;
10、陽性O(shè)D值比對(duì)照值大3倍,為判斷效價(jià)稀釋度。
Anti-ACD抗體,腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體溶解方法:方法1:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑(疊氮鈉或*),您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了??贵w溶解后,置于-20℃保存,分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補(bǔ)足,置于-20℃保存,這樣抗體不會(huì)凍,有利于抗體的穩(wěn)定。后續(xù)試驗(yàn)時(shí),再使用對(duì)應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個(gè)月有效;若在-20℃下保存(*),至少三年有效。