細(xì)胞擴(kuò)增的效率受到諸多因素的影響和限制,其中主要的限制性因素包括:細(xì)胞對(duì)剪切力的敏感性、氧的傳遞以及傳代和擴(kuò)大培養(yǎng)等。而研制的各種類型生物反應(yīng)器系統(tǒng)則可針對(duì)上述限制性因素,為微載體細(xì)胞培養(yǎng)與擴(kuò)增提供低剪切力、高氧傳遞效率、易于細(xì)胞傳代等適宜的外部環(huán)境。已較多使用的微載體培養(yǎng)基系統(tǒng)生物反應(yīng)器,可以實(shí)行計(jì)算機(jī)控制操作,培養(yǎng)攪拌速度及懸浮均勻程度、溫度變化、PH穩(wěn)定及溶氧供應(yīng)(O2、N2、CO2、空氣四種純化氣體按比例調(diào)節(jié))、罐壓、培養(yǎng)體積和通氣量等參數(shù)全部由電腦自動(dòng)控制。因此,應(yīng)用生物反應(yīng)器系統(tǒng)進(jìn)行微載體細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增具有明顯優(yōu)勢(shì),目前國(guó)外相繼研制了數(shù)種適合進(jìn)行微載體大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器系統(tǒng),如攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)、旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器系統(tǒng)以及灌注式生物反應(yīng)器系統(tǒng)等。
1、攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)在微載體細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增研究領(lǐng)域已有較長(zhǎng)的研究歷史,但因該細(xì)胞培養(yǎng)基系統(tǒng)容易產(chǎn)生過(guò)大的剪切力,從而限制了其應(yīng)用范圍。盡管如此,由于該系統(tǒng)具有簡(jiǎn)單、實(shí)用及價(jià)格低廉等特點(diǎn),國(guó)內(nèi)外仍有不少應(yīng)用該系統(tǒng)成功進(jìn)行細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增的研究報(bào)道。例如,Werner A(2000年)成功地在該系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行了肝細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增的研究。
2、灌注式生物反應(yīng)器系統(tǒng)灌流培養(yǎng)基是目前研究熱點(diǎn)之一。它的特點(diǎn)是不斷地加入新鮮培養(yǎng)基以及不斷地抽走含細(xì)胞代謝廢物的消耗培養(yǎng)基,使細(xì)胞得以在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境內(nèi)增殖,即省時(shí)省力,又減少了細(xì)胞發(fā)生污染的機(jī)會(huì),且可以提高細(xì)胞密度10倍以上。
3、旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器近年來(lái),旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器系統(tǒng)(RCCS)已經(jīng)成為應(yīng)用微載體技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增的一種較常用細(xì)胞培養(yǎng)基系統(tǒng)。RCCS既可以用于微載體大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng),又能在其內(nèi)培育細(xì)胞與支架形成的三維空間復(fù)合體。至今,近百種組織細(xì)胞均在該系統(tǒng)內(nèi)成功進(jìn)行了大規(guī)模擴(kuò)增。
250克 Sabouraud′s Agar 沙氏瓊脂培養(yǎng)基 用于真菌檢測(cè)
250克 Sabouraud′s Agar,Modified 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 真菌檢測(cè)
250克 Liquid Sabourand Medium 沙氏液體培養(yǎng)基 真菌、酵母菌增菌培養(yǎng)
250克 SDA 沙堡氏4%葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 分離培養(yǎng)及鑒別真菌、酵母菌和放線菌
250克 SDB 沙堡氏4%葡萄糖瓊脂肉湯 霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)
250克 Sabouraud,s 1% Dextrose Agar 沙氏1%葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 上培養(yǎng)增菌的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基,用于深淺部真菌的分離培養(yǎng)
250克 Yeast Extract Peptone Dextrose Agar YPD瓊脂 生物制品和蜜漿制劑酵母菌總數(shù)測(cè)定
250克 Yeast Extract Peptone Dextrose Broth YPD肉湯 BR
250克 EMB Agar EMB瓊脂 腸道致病菌的分離,亦可用于大腸埃希氏菌的分離和鑒別
250克 Bile Lactose Broth BL培養(yǎng)基 大腸桿菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)
250克 MacC 麥康克瓊脂(不含NaC1和結(jié)晶紫) 革蘭氏陰性菌的分離培養(yǎng)(抑制變形桿菌蔓延)
250克 MacC 麥康克瓊脂 用于分離腸道細(xì)菌
250克 Maconkey Agar No.3 麥康克瓊脂3號(hào) 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)
250克 SMAC 山梨醇麥康克瓊脂基礎(chǔ) 大腸桿菌O157:H7的選擇性分離培養(yǎng)
培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m MUG-Medium(with Kovacs) MUG培養(yǎng)基 大腸埃希氏菌快速熒光測(cè)定
250克 Triple Sugar Iron Agar 三糖鐵培養(yǎng)基 腸桿菌科細(xì)菌的生化試驗(yàn)
250克 Salmonella Shigella Agar SS瓊脂 沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的分離培養(yǎng)
250克 Cetrimide Agar Medium 溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基 綠膿桿菌的分離
250克 lurite Broth Base 亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng),每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
250克 Toxin-Producing Medium 產(chǎn)毒培養(yǎng)基 青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)