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細(xì)胞培養(yǎng)基分裂指數(shù)測(cè)定操作步驟與注意事項(xiàng)

操作步驟

　　1、消化細(xì)胞，將細(xì)胞培養(yǎng)基懸液接至內(nèi)含蓋玻片的培養(yǎng)皿中。

　　2、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，使細(xì)胞長(zhǎng)在蓋片上。

　　3、取出蓋片，按下列順序操作：

　　PBS漂洗3分鐘→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分鐘→Giemsa液染色10分鐘→自來(lái)水沖洗。

　　4、蓋片晾干后反扣在載玻片上，鏡檢。

　　5、計(jì)算:

　　分裂指數(shù)=分裂細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×*

NOV  Protein Cynomolgus 培養(yǎng)基重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP5  Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IGFBP5  Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NOV  Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP3  Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP4  Protein Cynomolgus 培養(yǎng)基重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP2  Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP1  Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGF1  Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白
IGFBP7  Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP7  Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP7  Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IGFBP6  Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP6  Protein Mouse 培養(yǎng)基重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGF2BP2  Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
NOV  Protein Human 重組人 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)
WISP1  Protein Human 重組人 CCN4 / WISP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP4  Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP4  Protein Human 重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP3  Protein Human 重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

　　注意事項(xiàng)

　　操作時(shí)動(dòng)作要輕，以免使蓋片上的細(xì)胞培養(yǎng)基脫落。

　　附：Giemsa染液配制：

　　稱Giemsa粉末0.5克，加幾滴甘油研磨，再加入甘油（使加入的甘油總量為33ml）。56℃中保溫90—120分鐘。加入33ml甲醇，置棕色瓶中保存，此為Giemsa原液。

　　使用時(shí)按要求用PBS稀釋。一般稀釋10倍。