培養(yǎng)基體內(nèi)、外細胞的差異分化和體外細胞分型
1、差異:細胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態(tài)平衡的相對穩(wěn)定環(huán)境中,日久天長,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長的連續(xù)細胞系或惡性細胞系。因此,培養(yǎng)基中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開始發(fā)生了。
雖然體外細胞與機體細胞存有差異,但并未失去研究的意義。且不論其有許多性狀仍與體內(nèi)相同(如體外培養(yǎng)的心肌細胞仍可博動),只從細胞遺傳學(Cyto-genetics)的角度看,離體細胞仍帶有全套的二倍體基因。細胞在培養(yǎng)中的表現(xiàn),只不過是相應基因關(guān)閉/開啟引起的現(xiàn)象,這并非是缺陷。恰恰相反,在培養(yǎng)的細胞中某些特定功能的喪失,可為該基因的表達與調(diào)控提供線索。
2、分化;體外細胞培養(yǎng)基分化能力并未*喪失,只是環(huán)境的政變,細胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細胞是否表現(xiàn)分化關(guān)鍵在于是否存在使細胞分化的條件,如Friend細胞(小鼠紅白血病細胞)在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白,血管內(nèi)皮細胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時能長成血管狀結(jié)構(gòu),雜交瘤細胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體,這些均屬于細胞分化行為。
體外細胞的分型:
(一)貼附型:大多數(shù)培養(yǎng)細胞貼附生長,屬于貼壁依賴性細胞,判斷細胞形態(tài)時不能接體內(nèi)組織學標推判定,僅大致分成以下四型:
1、成纖維細胞型:胞體呈梭型或不規(guī)則三角形,*有卵圓形核,胞質(zhì)突起,生長時呈放射狀。除真正的成纖維細胞外,凡由中胚層間充質(zhì)起源的組織,如心肌、平滑肌、成骨細胞、血管內(nèi)皮等常呈本型狀態(tài)。另外,凡培養(yǎng)中細胞的形態(tài)與成纖維類似時皆可稱之為成纖維細胞。
2、上皮型細胞:細胞培養(yǎng)基呈扁平不規(guī)則多角形,*有圓形核,細胞彼此緊密相連成單層膜。生長時呈膜狀移動,處于膜邊緣的細胞總與膜相連,很少單獨行動。起源于內(nèi)、外胚層的細胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態(tài)。
3、游走細胞型:呈散在生長,一般不連成片,胞質(zhì)常突起,呈活躍游走或變形運動,方向不規(guī)則。此型細胞不穩(wěn)定,有時難以和其他細胞相區(qū)別。
4、多型細胞型:有一些細胞,如神經(jīng)細胞難以確定其規(guī)律和穩(wěn)定的形態(tài),可統(tǒng)歸于此類。
(二)懸浮型;見于少數(shù)特殊的細胞培養(yǎng)基,如某些類型的癌細胞及白血病細胞。胞體圓形,不貼于支持物上,呈懸浮生長。這類細胞容易大量繁殖。